維生素測定培養(yǎng)基是利用萊士曼氏乳酸桿菌對維生素的特異性和靈敏性，定量測定出試樣中維生素的含量。在測定用培養(yǎng)基中供給除維生素以外的所有營養(yǎng)成分，這樣萊士曼乳桿菌生長濃度（吸光度）就會同標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液及未知待測溶液中維生素的含量呈正比的線性關(guān)系。以不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的維生素含量為橫軸，以萊士曼乳桿菌生長濃度（吸光度）為縱軸，即可繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出試樣中維生素的含量。
維生素測定培養(yǎng)基的常見問題回答：
1.該測定培養(yǎng)基能用肉眼判斷其pH值嗎？
答：該測定培養(yǎng)基中酚紅的含量與普通培養(yǎng)基中的酚紅含量不同，不能通過肉眼觀察或通過經(jīng)驗(yàn)來判定pH值，建議使用pH計(jì)進(jìn)行測定。
2.什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？
答：酚紅在培養(yǎng)基中用作pH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色，堿性時(shí)為紫色。酚紅本身對生物制品質(zhì)量并不會產(chǎn)生影響，可以通過純化技術(shù)去除，但酚紅在無血清培養(yǎng)基可能帶來胞內(nèi)鈉/鉀失衡，影響細(xì)胞生長，當(dāng)然這種作用能被血清所中和或減輕。酚紅并不是培養(yǎng)基中必需的一種成分，很多國外的疫苗或抗體生產(chǎn)企業(yè)在生產(chǎn)過程中都使用無酚紅培養(yǎng)基。
3.谷氨酰胺溶液和碳酸氫鈉的配制方法是什么？
答：以0.2mol/L的L-谷氨酰胺配制為例：稱取L-谷氨酰胺2.92g，加注射用水100ml，充分?jǐn)嚢杌靹?。?.2μm濾膜正壓過濾除菌。溶液應(yīng)在4℃下避光保存，2周內(nèi)使用。
以7.5%NaHCO3的配制為例：稱取NaHCO37.5g溶于100ml蒸餾水中過濾除菌。
4.維生素測定培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)是什么？
答：平衡鹽一般是由無機(jī)鹽及葡萄糖組成的。平衡鹽有Hanks′系統(tǒng)、Earle′s系統(tǒng)、Dulbecco′s磷酸緩沖鹽系統(tǒng)等。
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